UV定量は、一つの波長で吸収を示すものをすべて数えます。HPLCは、まず化合物を分離し、その方法が指定するものを数えます。二つの数値は、異なる問いに答えるものです。
同じに見えるエキスについて、二つの提案が届きます。一方は活性成分含量をUVで、もう一方はHPLCで示しており、UVの数値のほうが明らかに高くなっています。どちらかが誤っているとは限らず、素材自体は同じということもあり得ます。二つの方法は異なるものを数えており、それぞれ名称のある物質を基準として結果を表しています。
ここでは、二つの定量値を比較する前、または成績書と貴社自身の試験所の結果を比較する前に行いたい六つの確認点を紹介します。確認点は、生薬医薬品に関する欧州のガイダンス、分析法バリデーションに関する国際ガイドライン、公表された研究に基づいています。例は当社自身の規格から取っています。以前の記事では規格、抽出比、試験成績書（COA）、溶媒と賦形剤、汚染物質の行を扱いました。この記事では定量法に絞ります。
01 / 分析法
定量値の行には、分析法が記載されていますか？
定量値は、それを得た分析法と結びついています。生薬医薬品に関する欧州のガイダンスは、規格の定義にこのことを組み込んでいます。規格とは「試験の一覧、分析法と生物学的試験法への参照、および適切な判定基準」であり、適合とは、素材が「記載された分析手順に従って試験したとき、記載された判定基準を満たす」ことを意味します。1
規格では、分析法は数値の後に短い一語で記されていることがよくあります。UV、HPLC、あるいはその他の手法名です。それが書かれていない行は不完全です。American Botanical Councilと関連機関の著者らによる2023年のレビューは、分光光度法による定量の結果が「試験成績書に記載される、植物原料の化学組成に関する唯一のデータとなることがある」と指摘しています。さらに、定量結果の背景にある方法を明示することは「業界の標準的な慣行となるべきである」と付け加えています。2
確認点： 定量値の行に分析法が記載されていること、そして規格、見積もり、成績書のすべてが同じ分析法を記載していること。
02 / UV
UVの数値は何を数えていますか？
規格でUVとあれば、紫外可視吸光度測定法を指します。エキスを溶解し、多くの定量法では試薬によって目的の化合物を有色の生成物に変え、溶液が一つの波長で吸収する光を測定します。溶液中の化合物は互いに分離されないため、その波長で吸収を示すものはすべて結果に加算されます。2
その結果についてレビューは、分光光度法で得られた濃度は「対象外の分析対象物が目的の波長で吸収を示すことによる干渉のため、他の定量法による結果より高くなることが多い」と述べています。例はマリアアザミエキスで、シリマリンの濃度は「一般にHPLC-UVで30%～65%、分光光度法による試験で65–80%である」とされています。2
分析法バリデーションのガイドラインには、この性質を表す名称があります。特異性と選択性は、「分析対象物の測定に他の物質が干渉する程度」を表します。3 生薬医薬品に関する欧州のガイダンスは、非特異的な定量の例として、紫外可視吸光度測定法による定量を挙げています。1 したがって、UVの数値は化合物群についての数値であり、そのように読むべきものです。
確認点： UVの数値について、どの化合物群を数えることを意図しているか、そして、その方法が用いる試薬と波長。
03 / HPLC
HPLCの数値は何を数えていますか？
HPLC、すなわち高速液体クロマトグラフィーは、何かを測定する前に、溶解したエキスをその化合物ごとに分離します。化合物は別々のピークとして現れ、その方法が指定するピークが数えられます。カラムの後ろにある検出器も、たいていは光を測定するものです。レビューは、UV/vis検出器を「最も広く使われている検出システム」と呼んでいます。2 二つの方法の主な違いは、分離にあります。
したがってHPLCの数値は、その方法が指定する化合物を表します。一つの場合も、複数を合算する場合もあり、規格には、それがどの化合物なのかを記載すべきです。欧州医薬品庁のビルベリーに関する報告書が、その例を示しています。報告書は、欧州薬局方によるビルベリー生果実の精製標準化乾燥エキスの定義を引用しています。それは、アントシアニン32.4%～39.6%で、「シアニジン3-O-グルコシド塩化物として表される」というものです。報告書に挙げられたその定量のクロマトグラムには、名称が付けられた二十のピークが示されています。十五がアントシアニン、五がアントシアニジン（糖を持たない形のもの）です。4
方法が指定しない化合物は、エキスにどれだけ含まれていても数えられません。また、一部しか分離できない化合物群もあります。プロアントシアニジンについて、レビューは、より大きな分子の分離は「クロマトグラフィーによる方法では困難であり、そのためサプライヤーは一般に、定量分析に分光光度法を用いている」と述べています。2
確認点： HPLCの数値について、数えられている化合物、そしてその数値が複数の化合物の合計なのか、名称のある一つの化合物なのか。
04 / 標準品
どの標準品に照らし、何として表されていますか？
含量を求める定量では、どちらの方法も、試料からパーセンテージを直接読み取るわけではありません。信号は、名称のある物質を基準として量に換算されます。その物質は、標準品として併せて測定されるか、計算に組み込まれています。欧州のガイダンスでは、標準品は「確認試験および純度試験、ならびに含量の決定のため」に用いられます。1 その結果は、名称のある物質または物質群を基準として示されます。生薬および生薬調製物の表示に関するガイダンスが、その書き方を示しています。センナ葉ではヒドロキシアントラセン配糖体を「センノシドBとして換算」、イチョウ葉エキスではフラボノイドを「フラボン配糖体として表示」と記載します。5 名称が挙げられているものが、測定されたものとは限りません。イチョウに関する薬局方の方法では、通常、酸加水分解によってフラボノイドから糖を切り離してから、フラボノイドを定量します。2
標準品を変えると、方法と素材が同じままでも数値は変わります。クランベリーのプロアントシアニジンを呈色反応であるDMAC法で測定した場合、クランベリー自体から調製した標準品は「プロシアニジンA2で求めた値より2.2倍高い値となった」と、ある研究は報告しています。6
分子の形も数値に影響します。ビルベリーの報告書は、一つのエキスを二つの数値で記述しています。「アントシアノシド36%、アントシアニジン25%に相当」。後者の数値は、同じ分子を糖部分を除いて数えたものです。4
当社のクランベリーエキスは、分析法と標準品を明記した定量値の記載の一例です。総可溶性プロアントシアニジン（PACs）をBL-DMAC / UV-Visで30%以上とし、プロシアニジンA2当量として表示する規格です。この定量法では、プロシアニジンA2を標準品として用い、640 nmの吸光度を測定します。単離されたA型PACの純度を確定するものではありません。異なる分析法や検量用標準品で得られた結果は、自動的に比較できるわけではありません。
確認点： 標準品と、結果が何として表されているか（名称のある一つの化合物か、化合物群か、糖部分を持つ分子か持たない分子か）。
05 / 方法の選択
必要な数値には、どの方法が適していますか？
HPLCが常により優れた方法であるわけではありません。バリデーションガイドラインは、どのような方法のバリデーションでも示さなければならないことを述べています。「分析法が意図した目的に適していること」です。3 指標成分が一つの化合物、または少数の化合物である場合は、分離を伴う方法でそれらを直接数えることができます。クロマトグラフィーでは分離しきれない化合物群全体が対象である場合は、化合物群の定量が通常の手段です。2
クランベリーを対象としたDMAC法の複数試験所による共同研究は、この方法を「クランベリー試料中の総PACsを対象とする、簡便で頑健かつ比較的特異性の高い分光光度法による定量」と呼び、さらに「異なる種類の食品間で濃度を比較するには適さない場合がある」と付け加えています。7
化合物群の定量では、化合物の由来を示すことはできません。プロアントシアニジンに用いられる呈色反応のうち、「由来の異なるPACsを区別できる」ものは一つもないと、レビューは述べています。2 生薬医薬品に関する欧州のガイダンスは、可能な場合は常に特異的な分析法を優先しています。非特異的な定量に正当な理由がある場合には、第二の試験を示しています。「定量と、適切な確認試験（例：フィンガープリントクロマトグラフィー）との組合せを用いることができる」。1 バリデーションガイドラインは、これを一般的な形で述べています。特異性の不足は、「適切に正当化される場合を除き、一つまたは複数の他の補完的な分析法によって補うべきである」としています。3
確認点： 分析法が指標成分に適していること、そして化合物群の定量を用いる場合は、どの確認試験が併せて行われているか。
06 / 貴社の試験所
貴社自身の試験でも、同じ方法が使われますか？
数値を確認できるのは、その数値を得た方法だけです。貴社の試験所が、UVで書かれた規格に対して納入品をHPLCで試験した場合、その結果が低く出ても高く出ても、その規格に対する結果ではありません。一方の数値を他方に換算する一般的な係数はありません。差は、エキスにほかに何が含まれているかと、それぞれの結果がどのように表されているかによって決まります。
同じ方法でも、二つの試験所が同じ数値を返すとは限りません。複数試験所による共同研究では、五つの試験所が同じ十一のクランベリー試料を、同じDMAC法で分析しました。結果のばらつきは、試験所内では平均4.1%、試験所間では平均16.9%（範囲は8%～32%）で、相対標準偏差として測定されています。7
そこで、発注の前に三つの点を決めておいてください。分析法（名称と、準拠する薬局方または文書化された手順を明記したもの）、標準品、そして二つの試験所の結果の差として双方が受け入れる範囲です。薬局方に各条（モノグラフ）のある医薬品については、別の方法が用いられた場合にどの方法が決め手になるかを、欧州のガイダンスが示しています。「疑義または紛争がある場合は、薬局方の分析法が拠り所となる。」1 薬局方の方法が適用されない場合は、合意した規格がその役割を果たす必要があります。試験成績書に関する当社の記事では、成績書が届いたときに行うべき確認点を説明しています。
確認点： 貴社の試験所と、成績書の数値を出した試験所が、同じ分析法と同じ標準品を用いていること、そして両者の結果の差として、どの程度までを双方が受け入れるか。
送付いただく情報
分析法は、お問い合わせの際にお知らせください
定量値が貴社の製品にとって重要な場合は、次の情報をお知らせください：
- 原料名（複数の部位をご用意している場合は植物部位も）；
- 想定する用途と仕向け市場；
- 必要とされる化合物または化合物群と、目標とする含量；
- 貴社の品質チームが用いる定量法と、定量の一部である場合は標準品；
- 納入品を貴社自身で試験されるかどうか、また、どの方法で試験されるか；
- 必要とされる技術資料（規格書や試験成績書（COA）など）；
- お名前、会社名、連絡先。
活性成分含量（%）は、分析法と標準品を併せて示すと、より有用な情報になります。これらの要件を目標値とあわせてお知らせいただければ、プロジェクトに必要な原料を規格と見積もりに正確に反映できます。当社のカタログに記載の規格範囲は参考値です。実現可能性、供給可否、価格は、見積もりとあわせて確認します。
製品の例は、YOHOLIFE®の規格および技術資料に基づいています。この記事は、当社の原料について、ほかの定量値を示していません。選択するグレードの分析法と規格は、お問い合わせの際に確認します。出典1、3、4、5は医薬品を対象として書かれたもので、定義と例のためにここで引用しています。出典2は公表された研究のレビューです。出典6と7はクランベリーに対する一つの定量法を調べた研究で、公表された抄録だけを読んでいます。出典は2026年11月12日に確認しました。
