生菌数とは、エキスの試料から生育したコロニーの数を、グラムあたりに換算した値です。「不検出」とは、試験した量の中で見つからなかったことを意味します。どちらも、試験を行った日のバッチの状態を表します。
微生物の行は、植物エキスの規格の終わり近くにあります。一般生菌数、酵母とカビの数、そして「不検出」または「陰性」と記された二つか三つの細菌です。どれも短い行で、読み飛ばされがちです。エキスは植物から作られます。欧州医薬品庁の生薬医薬品委員会のリフレクションペーパーも、この事実から出発しています。「天然由来であるため、生薬は一般に、化学合成された原薬と比べて微生物の含有量が多い。」1
ここでは、これらの行で行いたい六つの確認点を紹介します。確認点は、生薬医薬品に関する欧州のガイダンス、欧州連合と米国の食品法、サプリメントに関する公表された研究に基づいています。以前の記事では規格、抽出比、試験成績書（COA）、溶媒と賦形剤、重金属と農薬の行、定量法を扱いました。この記事では微生物に絞ります。
01 / 各行
規格には、どの微生物が挙げられていますか？
行は二種類あります。二つは菌数で、総好気性微生物数（TAMC）と、酵母とカビを合わせた総真菌数（TYMC）です。前者は、規格では一般生菌数のような名称で記載されることがあります。名称だけでは分析法はわかりませんので、どの方法が使われたかをお尋ねください。分析法については、第六の確認点でもう一度取り上げます。残りは名称の挙がった微生物で、その大半は、定められた量の中で見つかってはいけません。リフレクションペーパーは、生薬、生薬調製物、生薬医薬品の規格について、「特段の正当な理由がない限り、TAMCとTYMCの試験、および一部の特定微生物が存在しないことの試験を含めるべきである」と結論づけています。1
欧州薬局方には、こうした微生物の短い一覧について、試験が記載されています。経口用の生薬医薬品とその調製に用いるエキスを対象とする章（2.6.31）は、大腸菌、胆汁酸抵抗性グラム陰性菌、サルモネラを扱っています。特定微生物に関する一般章（2.6.13）は、これに緑膿菌、黄色ブドウ球菌、クロストリジア、カンジダ・アルビカンスを加えています。1 この一覧は固定されたものではありません。規格に関する欧州のガイダンスは、「他に考えられる病原菌（例：カンピロバクター属菌やリステリア属菌）を加えることを検討する際には」、植物の由来を考慮すべきだとしています。2
名称の挙がった微生物のすべてが、あるかないかの問題というわけではありません。次の確認点で取り上げる2019年の研究は、胆汁酸抵抗性グラム陰性菌について「存在と数」を判定しました。3
確認点： 規格が、二つの菌数のそれぞれに限度値を示し、それ以外の微生物をそれぞれ名称で挙げて、限度値または「不検出」の語を記していること。「適合」とだけ書かれた一行になっていないこと。
02 / 菌数
CFU/gで示される菌数には、何が含まれていますか？
菌数は、細菌の重さではありません。たとえば、後述の2019年の研究では、各試料を調製して希釈し、培地と混ぜて培養しました。生育したコロニーを数え、結果は、グラムあたりのコロニー形成単位（CFU）、表記ではCFU/gとして、液体の場合はミリリットルあたりとして算出されました。3 菌数が数えるのは、試験の条件下で増殖するもの、つまり「好気条件で増殖し得る」細菌と真菌です。1
ゼロを上回る結果は、アルコールで作ったエキスであっても、それだけで不具合を示すものではありません。エタノールは増殖中の細胞には作用しますが、「細菌の芽胞には無効である」とされています。試験では栄養分と温かさが与えられるため、ある種の細菌、主に好気性のバチルス属菌の芽胞も、細菌と一緒に数えられます。アルコールで抽出した後に残るものは、「主に細菌の内生胞子で占められる」とされています。同ペーパーはさらに、加熱を伴う含水アルコール抽出では、通常、TAMCが10,000 CFU/ml未満の製品が得られるとしています。この数値は液体についてのものです。第五の確認点で説明するとおり、アルコールを蒸発させて乾燥エキスにすると、菌数が再び上がることがあります。1
2019年に発表された研究は、実際の範囲を示しています。著者らは、植物原料を含むサプリメントの122試料についてのバッチ出荷試験と、植物由来の原料30試料についての試験を分析しました。全試料のうち92.1%に細菌が含まれており、芽胞形成性のバチルス属菌はほぼすべての試料で見つかりました。著者らが適用した限度値、すなわち好気性微生物数で100,000 CFU/g、酵母とカビで10,000 CFU/gに照らすと、前者を超えたのはサプリメント六試料と原料二試料、後者を超えたのはサプリメント五試料と原料六試料でした。3
確認点： 単位であるCFU/gと、二つの菌数それぞれの限度値。
03 / 不検出
どれだけの量で不検出ですか？
どんな試験でも、微生物がバッチ全体に存在しないことは示せません。示せるのは、調べた量の中でその微生物が見つからなかったことだけです。したがって、その量が記載されて初めて、行は完全になります。欧州連合の食品法は、この量を限度値の中に書き込んでいます。たとえば、そのまま喫食できる発芽種子のサルモネラでは、基準は「25 g中に検出されない」で、五つの試料単位のそれぞれについて適用されます。4 微生物学的基準の定義も、同じ形をしています。このような基準は、「質量、容積、面積またはバッチの単位あたりの、微生物の不在、存在もしくは数、および／またはその毒素／代謝産物の量」に基づくものです。4
試験する量は一定ではありません。欧州薬局方の方法に従った2019年の研究では、大腸菌は1 g、サルモネラは10 gで試験しています。3 上に挙げた食品の基準は25 gを用いています。量が多いほど試験は厳しくなるため、「25 gで不検出」と「1 gで不検出」は別の限度値です。単に「陰性」とだけ書かれた行では、どちらが適用されたのかがわかりません。
確認点： 不検出または陰性とされた微生物のそれぞれについて、試験した量と試料の数。
04 / 参照基準
限度値の出どころはどこですか？
欧州の生薬医薬品では、限度値は欧州薬局方に由来します。リフレクションペーパーの説明によると、5.1.8章は、完成した生薬医薬品を、作り方と使い方に応じてA、B、Cの三つのカテゴリーに分けています。熱湯で淹れるハーブティーには、比較的高い菌数が認められています。経口用のエキスは、加工しても微生物がカテゴリーBの基準に届くほど減らないことが示される場合には、カテゴリーCを満たすべきであると、同ペーパーは付け加えています。1 規格に関する欧州のガイダンスは、エキスを含む経口用の生薬調製物が「Ph. Eur. 5.1.8章に沿ったもの」であることを求めています（Ph. Eur.は欧州薬局方のことです）。2
植物素材そのものについては、同ガイダンスによると、薬局方の章に限度値の定めはありません。判定基準は「設定すべきである」とされ、5.1.8章のA節の限度値は「出発原料としての生薬について許容できると考えてよい」とされています。2
食品法の定めは、これより限られています。微生物学的基準に関する欧州連合の規則は、食品区分ごとに限度値を定めており、その附属書には、食品サプリメント、ハーブ、植物エキスの名を冠した区分はありません。特定の種類の食品に結びついていない行は、そのまま喫食できる食品についてのものだけで、それらは単一の微生物、リステリア・モノサイトゲネスの基準を定めています。4 2019年の研究の著者らは、この附属書がサプリメントを独立したグループとして位置づけていないことを指摘し、その品質への責任は「製造する企業にある」と付け加え、サプリメントの基準は「生薬医薬品に対するものに劣らない」ものとすべきだと提案しています。3 米国でも、ダイエタリーサプリメントに関する規則は数値を定めていません。サプリメントを作る企業は、構成成分ごとに、「ダイエタリーサプリメントの最終バッチを不良食品とし得る、または不良食品化につながり得る、そうした種類の汚染についての限度値」を設定しなければなりません。5
したがって、医薬品以外では、エキスの規格にある微生物限度は、おおむね選択の問題であり、規格には、それが何に従っているかを記載すべきです。薬局方の章とカテゴリー、食品法の基準、またはサプライヤーか購入者が定めた数値のどれかです。どれなのかをお尋ねください。また、それが貴社の作る製品に合っているかもお尋ねください。完成した生薬医薬品の限度値は、その剤形と服用方法によって異なるからです。1
確認点： 各限度値の根拠となる基準、そして薬局方の限度値であれば、その章とカテゴリー。
05 / 処理
菌数はどのように下げられましたか？
菌数が低いのは、清浄な植物素材と速やかな乾燥によることもあれば、あとから加えた処理によることもあります。リフレクションペーパーが望ましいとするのは前者です。汚染は、理想的には「汚染除去の方法を用いるのではなく、予防によって」抑えるべきであり、処理は「微生物学的な品質の悪さを隠すために」用いてはなりません。1
抽出そのものも、ある程度までは処理にあたります。同ペーパーは、60から95%のエタノールに「栄養型に対する顕著な殺菌作用および殺真菌作用」があるとしています。ただし、アルコールを蒸発させると、濃縮物に残った水分が「微生物の増殖を助長するおそれがある」ため、菌数が再び上がることがあります。1 同ペーパーが挙げるほかの方法には、熱と蒸気があります。
個別の記載が必要な処理が二つあります。一つ目はエチレンオキシドガスです。生薬の汚染除去にこれを使うことは、「1989年12月31日以降、欧州連合で禁止されている」と、同ペーパーは記録しています。1 1999年の食品指令は、乾燥ハーブと香辛料についても同様に述べており、その汚染は「残留物の毒性の可能性があるため、エチレンオキシドなどのくん蒸剤で処理することはもはやできない」としています。6
二つ目は放射線照射です。同ペーパーは、生薬調製物への照射を「勧められない」としています。1 食品法では、同じ1999年の指令が、照射してよい食品についての欧州連合独自のリストを定めており、そのリストには項目が一つだけあります。「乾燥した芳香性ハーブ、香辛料および野菜調味料」です。6 このリストが完成するまで、加盟国は、すでに存在していた認可を、同日付の枠組み指令である指令1999/2/ECが定める条件の下で維持することができます。7 食品または食品原料が照射された場合、「処理の表示は、いかなる場合も、照射された食品に付随する、またはそれを参照する書類に記載しなければならない」とされています。7
ほとんどの処理は、微生物がすでに残したものを元に戻しません。生きている菌数は下げますが、「カビ毒やエンドトキシンの量は減らさない」のです。また、処理を行う場合、生薬に関する薬局方の各条は、同ペーパーが引用するところによると、「植物の成分が影響を受けておらず、有害な残留物が残っていないこと」の証明を求めています。1
確認点： 植物素材またはエキスが菌数を下げるために処理されたかどうか、処理されたのであればどの方法か、そして放射線照射とエチレンオキシドについて書類に何と書かれているか。
06 / 保管
エキスが手元に届くときにも、この結果は当てはまりますか？
微生物の行は、試験のあとに変わり得るものの一つです。微生物は、増殖するのに水を必要とします。1 「水分活性が0.60未満の製品では、カビと酵母は増殖しない」ことは、一般に認められています。8 大多数の細菌が増殖できる最低の水分活性はそれより高く、約0.85です。また、同ペーパーは、通常の条件で保管された乾燥生薬素材の水分活性を、多くの場合0.50から0.60としています。保管中に水分を吸う粉末は、これを上回ることがあります。吸湿性の素材は、同ペーパーによると、「微生物の増殖をより支えやすい」とされています。1 温かさもリスクを高めます。ヒトの病原菌を含む一部の微生物は、30°Cから40°Cで最もよく増殖し、特に相対湿度が高いときはそうです。8
そのため、これらの行は、水分または乾燥減量の行、包装、保管条件とあわせて読んでください。水分の数値はリスクを判断する助けになりますが、そのような試験は「TAMCとTYMCの試験の代わりにはならない」とされています。1
納入品を再試験する場合は、先に三つの点を取り決めてください。方法、量と試料の数、そして所要時間です。方法については、欧州のガイダンスが「薬局方の手順（2.6.12、2.6.31）またはその他のバリデートされた手順」を求めています。2 食品規則は、その附属書に掲げる分析法を、参照法として適用しています。4 量と試料の数は、第三の確認点で述べたものです。所要時間については、従来の方法は時間がかかり、結果は「5-14日の培養期間を経る前には」得られません。1
成績書の結果がそのバッチで測定されたものかどうかは、別の問題です。試験成績書に関する当社の記事では、定期的試験と、成績書が手元のバッチについて何を示すかを説明しています。
確認点： 水分または乾燥減量の行、包装と保管条件、そして再試験の前には、方法、試験する量、試料の数。
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- 貴社の品質チームが二つの菌数について適用している限度値と、その根拠となる基準；
- 不検出でなければならない微生物と、その量；
- 微生物の結果をバッチごとに必要とするかどうか；
- 放射線照射またはエチレンオキシド処理に関する書面での記載が必要かどうか；
- 必要とされる技術資料（規格書や試験成績書（COA）など）；
- お名前、会社名、連絡先。
技術資料とCOAサポートを提供しています。ご用意できる書類の内容は、原料およびプロジェクトごとに確認します。当社のカタログに記載の規格範囲は参考値です。実現可能性、供給可否、価格は、見積もりとあわせて確認します。
この記事は公表されたガイダンスと法令を説明するもので、YOHOLIFE®の原料についての微生物の数値は示していません。選択するグレードの規格と書類は、お問い合わせの際に確認します。出典1、2、8は生薬医薬品を対象として書かれたもので、定義と考え方のためにここで引用しています。欧州薬局方については、これらの出典の記述に沿って説明しています。本文と限度値そのものは、現行版でご確認ください。出典3は公表された研究、出典4、6、7は欧州連合の食品法、出典5は米国の法令です。グレートブリテンには、ここで引用した食品規則の独自版がありますが、ここでは扱っていません。出典は2026年11月12日に確認したもので、参考としてのご案内であり、規制上の助言ではありません。
